Organizacja dzieliła się na okręgi wojewódzkie, a te z kolei na koła w danych miejscowościach. Działalność organizacji była podzielona na sekcje tematyczne. Kobiety działające w sekcjach odczytowych zajmowały się organizowaniem pogadanek, spotkań i odczytów mających na celu dokształcenie i uświadomienie kobiet w sprawach higieny, religii, zdrowia, historii i polityki. Do prowadzenia takich spotkań zapraszano kompetentne w swoich dziedzinach osoby, jak np. lekarzy, ekonomistów, historyków. Sekcje zajmujące się pomocą dzieciom miały za zadanie ratowanie porzuconych niemowląt i opiekę nad sierotami do trzeciego roku życia. W tym celu zakładano specjalne ochronki i przytułki.
Działaczki NOK dbały również o duchowy wymiar opieki nad dziećmi, ponieważ organizowały chrzty porzuconych dzieci. Istniały również sekcje pomocy samotnym matkom i rodzinom. Sekcje te organizowały wsparcie materialne dla rodzin w trudnej sytuacji finansowej. Pomoc ta wyrażała się w przede wszystkim we wsparciu przy poszukiwaniu pracy lub mieszkania, przekazywano także odzież i żywność oraz wyprawki szkolne dla dzieci, starano się również zapewnić pomoc medyczną. Sekcje pomocy najbiedniejszym zajmowały się prowadzeniem jadłodajni dla najbiedniejszych. Pomoc ta cieszyła się bardzo dużą popularnością zwłaszcza w czasach kryzysu gospodarczego, gdy w samej tylko Łodzi wydawano ok. 15500 obiadów miesięcznie.
Oddziały NOK organizowały także dla ubogich zabawy świąteczne i wyjazdy do sanatoriów, dofinansowywały również obozy letnie dla dziewcząt zagrożonych gruźlicą i anemią, w celu polepszenia ich stanu zdrowia. Według danych z 1929 r. NOK prowadziła w całym kraju: czterdzieści pięć świetlic dla dzieci, dwadzieścia jeden ochronek, trzynaście przedszkoli, a także przytułki położnicze i sanatorium „Odrodzenie” w Zakopanem. Powstawały także prowadzone przez NOK biura pośrednictwa pracy, biblioteki, kawiarnie i różnego rodzaju warsztaty rzemieślnicze, jak np. warsztat czapek w Suwałkach i pracownia koronek w Borysławiu. Warsztaty te z jednej strony zapewniały miejsca pracy, a z drugiej wspierały finanse organizacji. Oddział wileński prowadził w latach trzydziestych szkołę gospodarstwa domowego, przygotowującą młode dziewczęta do roli gospodyń domowych. Poszczególne oddziały oferowały również kursy dla kobiet: pisania i czytania, szycia, gotowania, zarządzania finansami domowymi. Oddział NOK w Kaliszu utworzył w 1928 r. Uniwersytet Powszechny im. Henryka Sienkiewicza.
W czasie wojny polsko-bolszewickiej członkinie NOK zajmowały się pracą na rzecz żołnierzy polskich urządzając herbaciarnie ma stacjach kolejowych, szyjąc mundury, wysyłając książki na front. Opiekowały się także rannymi i inwalidami oraz organizowały gwiazdkę dla żołnierzy w koszarach. Natomiast w czasie powstań śląskich działały w Śląskim Czerwonym Krzyżu oraz prowadziły punkty opatrunkowo–odżywcze dla powstańców. Pod koniec lat trzydziestych NOK zajęła się organizowaniem kursów obrony przeciwgazowej oraz zbiórkami środków na polskie okręty wojenne. Włączała się w także w propagandę antyniemiecką i antykomunistyczną.
Ważny dla członkiń NOK był również rozwój duchowy. Dlatego organizowały rekolekcje, nabożeństwa i wydawały publikacje katolickie, jak np. książkę autorstwa Wandy Ładziny „Zjawiska w Lourdes”. W maju 1926 r. działaczki NOK wzięły udział w ogólnopolskiej pielgrzymce kobiet polskich na Jasną Górę składających dziękczynienie Matce Bożej za odzyskanie niepodległości. W imieniu NOK przemawiała wówczas Irena Puzynianka, która składała ślubowanie wiernej służby Bogu i Ojczyźnie.
Organizacja podejmowała także współpracę z wieloma polskimi i zagranicznymi organizacjami. Jednak działaczki miały od władz naczelnych zakaz współpracy z organizacjami żydowskimi i komunistycznymi. Wraz ze Stronnictwem Narodowym NOK brała udział w wydarzeniach upamiętniających ważne rocznice historyczne, np. rocznicę obrony Lwowa, uchwalenia Konstytucji Trzeciego Maja. Współpracowały też z Towarzystwem Gimnastycznym Sokół, Młodzieżą Wszechpolską, Stowarzyszeniem Zjednoczonych Ziemianek i Polskim Czerwonym Krzyżem.